目的 研究耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌分子流行病学规律及耐药机制，为临床预防和治疗铜绿假单胞菌的感染提供理论依据。方法 对多中心收集的耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌（carbapenems-resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA）开展多位点序列分型（multilocussequencetyping,MLST）和遗传信息研究，并对碳青霉烯酶基因与外膜孔蛋白OprD编码基因进行序列分析。结果 多位点序列分型方法将81株CRPA分为36个ST型，总体以ST3390（41.98%,34/81）为主，其中有5种为新发现的ST型别；CRPA菌株中碳青霉烯酶基因的检出率较高（65.43%,53/81），尿液标本检出率最高（80.00%,28/35），其中IMP、VIM和NDM型碳青霉烯酶基因检出率分别为37.04%、27.16%和1.23%，未检测到KPC、GES、SPM和OXA-40型碳青霉烯酶基因；oprD基因的序列比对分析发现，高达96.29%（78/81）CRPA临床分离株发生了各种类型的突变，以单个或者多个碱基的插入或缺失为主（76.54%,62/81）。结论 81株CRPA主要的耐药机制为膜孔蛋白基因突变和产碳青霉烯酶；存在ST3390克隆株的局部流行，应加强医院感染防控措施，防止暴发流行。