目的 构建过表达及敲减LncRNA RP11-521C20.3的非小细胞肺癌A549稳转细胞株。方法 根据lncRNA RP11-521C20.3基因序列，设计合成引物并进行扩增。将目的基因与Sbf I和EcoRI酶切的载体连接，构建pcSLenti-pA-RP11-521C20.3-CMV-SFH-EGFP-P2A-Puro-WPRE重组质粒，转染293T细胞，包装含lncRNA RP11-521C20.3质粒重组体的慢病毒。构建shRNA（RP11-521C20.3），连接到AgeI和EcoRI双酶切后的pSLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE载体上，经鉴定后转染293T细胞。再利用慢病毒介导，构建重组质粒pcSLenti-pA-RP11-521C20.3-CMV-SFH-EGFP-P2A-Puro-WPRE和pSLenti-U6-shRNA（RP11-521C20.3）-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE，导入A549细胞。最后采用RT-qPCR技术在基因水平检测lncRNA RP11-521C20.3的表达。结果 OV-lncRNA RP11-521C20.3组（过表达组）的lncRNA RP11-521C20.3 mRNA表达量高于NC-lncRNA RP11-521C20.3组（过表达对照组）（P ＜0.001），差异倍数为（20.43±0.69）。sh-lncRNA RP11-521C20.3组（敲减组）的lncRNA RP11-521C20.3mRNA表达量低于sh-NC组（敲减对照组）（P ＜0.001），差异倍数为（0.21±0.08）。结论 成功构建了lncRNA RP11-521C20.3过表达及敲减稳转细胞株。为后续研究lncRNA RP11-521C20.3在慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病机制中的作用奠定重要基础。