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大鼠骨髓间充质干细胞的原代培养及鉴定

Primary Culture and Identification of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells from Rat

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊

机构: [1]云南省保山市人民医院妇科 [2]昆明医科大学第一附属医院 [3]昆明医科大学附属延安医院
出处:

关键词: 骨髓间充质干细胞 大鼠 分离 培养

摘要:
目的:研究大鼠BMSCs(骨髓间充质干细胞)原代培养与纯度鉴定的方法。方法:无菌环境中,从SD大鼠股骨与胫骨端采集骨髓,先行酶消化,利用全骨髓细胞悬液贴壁法对提取BMSCs实施传代培养,选取生长良好的第3代细胞进行鉴定;对BMSCs实施成脂与成骨诱导分化,同时经由油红O(ORO)与茜素红(ARS)染色法对诱导分化效果加以鉴定;借助流式细胞术(FCM)对CD34、CD44与CD90这3类BMSCs表面标志物的表达展开分析。结果:BMSCs是长梭状贴壁细胞,生长状态为纤维细胞样漩涡状;在第3代BMSCs传代期间,其第1-3 d发展至生长潜伏期,呈较慢速的生长;第3-5 d发展至对数生长期,呈高速生长;待至第7 d长速增殖最大,速度停止上升进入平缓期;BMSCs成骨、成脂诱导结束后,对其诱导分化鉴定发现:细胞出现明显形态学变化,通过ORO对脂肪染色,细胞显示橘红色;待成骨诱导培养结束,通过ARS对钙盐染色,显示红色,且出现矿化结节沉积,说明BMSCs具有良好的成骨、成脂分化能力;FCM测定发现:CD34表达呈阴性(1.09%),CD90(96.8%)与CD44(92.4%)皆呈阳性,与BMSCs表型相符。结论:经由全骨髓黏附培养技术有效分离BMSCs,且完成培养。

基金:

基金编号: 81960269

语种:
第一作者:
第一作者机构: [1]云南省保山市人民医院妇科
共同第一作者:
通讯作者:
通讯机构: [2]昆明医科大学第一附属医院 [3]昆明医科大学附属延安医院
推荐引用方式(GB/T 7714):

资源点击量:52537 今日访问量:0 总访问量:1562 更新日期:2024-09-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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