目的 调查分析云南省流行性乙型脑炎（乙脑）分子流行病学、实验室及影像学特征，为早期诊断及防控提供指导。方法 汇总整理2016—2022年云南省乙脑监测管理系统信息和个案调查资料，获取所有病例年龄、性别、地区、季节、实验室及影像学检查结果，采用描述性流行病学方法展开统计分析。结果 2016—2022年云南省乙脑共发生461例，年均发病率0.14/10万，其中2016年发病率最高，为0.23/10万，整体呈下降趋势。461例乙脑病例中男女比例为1.45∶1;0～＜10岁占比最高，达29.29%；云南省10个地级市均出现乙脑，位居前3位分别为昆明市26.89%（124/461）、普洱市12.58%（58/461）、红河州12.15%（56/461），且4个季节均有发生，主要集中于秋季83.73%（386/461）。461例乙脑病例脑脊液、血清IgM阳性占比分别为82.21%（379/461）、67.03%（309/461），有444例接受腰椎穿刺检查，92.12%（409/444）脑脊液蛋白＞0.45 g/L。脑电图、MRI检查及头颅CT检查的阳性检出率分别为97.83%（451/461）、95.87%（302/315）、52.89%（174/329）。结论 2016—2022年云南省乙脑发生率整体呈降低趋势，且高发于秋季，年龄越低感染风险越高，患病者多表现出脑脊液蛋白升高、脑电图异常，建议疫情防控部门以秋季防控为主，延长防控时段。