目的 应用CRISPR/Cas9技术构建蛋白磷酸2调节亚基B″家族α亚型（PPP2R3A）基因敲除小鼠，从分子水平及组织水平上研究PPP2R3A缺失对心脏的影响。方法 将Cas9 mRNA和两个靶向PPP2R3A第3外显子翻译起始密码子附近区域的单导向RNA微注射到C57BL/6小鼠受精卵中。小鼠出生后取其基因组DNA进行聚合酶链反应（PCR）和测序以鉴定基因型，鉴定后，基因PPP2R3A缺失型小鼠为KO组，野生型C57BL/6小鼠为WT组（雄性3只，雌性2只）。小鼠心脏组织经甲醛固定并制成切片后分别进行苏木素-伊红（HE）染色和免疫组织化学染色。提取小鼠心脏组织总RNA和蛋白，应用荧光定量PCR和Western印迹验证基因敲除小鼠的有效性和检测互作蛋白表达。结果 获得F1代PPP2R3A杂合小鼠，PCR和测序结果表明突变小鼠的基因型存在113 bp的缺失突变。与WT组相比，KO组心脏组织中PPP2R3A mRNA和蛋白表达量明显下降（均P＜0.05）,参与心脏发育的G蛋白信号转导调控因子（RGS）19表达量明显升高（P＜0.05）。PPP2R3A蛋白表达受损引起了心脏组织病理学变化。结论 PPP2R3A在体内可能通过与RGS19蛋白互作来参与心脏的发育并对心脏功能产生影响。