目的　构建并鉴定气道上皮细胞条件性Src同源区2蛋白酪氨酸磷酸酶1（SHP-1）基因 敲除小鼠，观察慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）患者气道上皮 SHP-1表达情况及 SHP-1表达缺陷对肺气 肿 小 鼠 表 型 的 影 响 。 方 法　 检 测 慢 阻 肺 患 者 肺 组 织 中 气 道 上 皮 SHP-1 的 表 达 情 况 。 采 用 CRISPR/Cas9技术构建SHP-1flox/flox转基因小鼠，并将其与气道上皮细胞Clara蛋白10-环化重组酶与雌 激素受体融合转基因小鼠（CC10-CreER+/+）进行交配，腹腔注射他莫昔芬后，获得气道上皮SHP-1基因 敲除小鼠（SHP-1flox/floxCC10-CreER+/-，SHP-1Δ/Δ ）。提取小鼠鼠尾和肺组织DNA，经PCR扩增后判别小鼠 的基因型；通过 qRT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法验证气道上皮细胞 SHP-1 基因的敲除效果。 使用弹性蛋白酶构建肺气肿小鼠模型，评估各组小鼠肺气肿严重程度。结果　慢阻肺患者气道上皮 SHP-1表达显著下调。基因型鉴定证实 SHP-1Δ/Δ小鼠表达 CC10-CreER 及 SHP-1-flox。他莫昔芬诱导 后，我们从 DNA、RNA及蛋白水平证明 SHP-1Δ/Δ小鼠气道上皮细胞中 SHP-1蛋白表达缺失，表明气道 上皮细胞特异性SHP-1基因敲除小鼠构建成功。肺气肿动物模型中，SHP-1Δ/Δ小鼠与对照组相比，肺 气肿表型更为严重，表现为肺组织肺泡结构紊乱，肺泡壁破裂融合形成肺大疱。结论　本研究成功建 立并鉴定气道上皮细胞 SHP-1基因敲除小鼠模型，为深入阐明 SHP-1在慢阻肺进程中的作用及其机 制提供了新的实验工具。