背景：髓核细胞的退变是椎间盘退变的关键环节。铁死亡是一种新型程序性细胞死亡方式，与椎间盘退变的发生和发展密切相关，但其具体机制尚不明确。目的：旨在通过使用叔丁基氢过氧化物(tert-Butyl hydroperoxide,TBHP)诱导髓核细胞铁死亡，构建体外氧化应激模型，探讨TBHP诱导髓核细胞铁死亡的机制，进一步理解铁死亡在椎间盘退变中的作用。方法：采用不同浓度的TBHP(0,25,50,100,200μmol/L)处理髓核细胞，利用荧光显微镜与CCK8检测髓核细胞形态及细胞活力水平。采用TBHP 100μmol/L、铁死亡诱导剂RSL3 10μmol/L及二甲基亚砜干预髓核细胞，利用Ed U实验检测细胞增殖能力。通过Western blot和免疫荧光检测铁死亡相关蛋白(谷胱甘肽过氧化物酶4、铁蛋白重链1、PTGS2和ACSL4)与椎间盘退变标志蛋白(基质金属蛋白酶13和Col2A)的表达，使用活性氧检测试剂盒和C11-BODIPY探针测定活性氧及脂质过氧化水平，并通过电镜观察线粒体形态变化。结果与结论：(1)TBHP处理显著降低了髓核细胞的活力和增殖水平；(2)TBHP诱导髓核细胞发生典型的铁死亡形态学变化；(3)TBHP处理导致铁死亡抑制蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4和铁蛋白重链1表达下降，铁死亡促进因子ACSL4和PTGS2表达上升；(4)TBHP处理增加了髓核细胞内活性氧生成和脂质过氧化水平；(5)电镜观察显示TBHP处理后的髓核细胞线粒体表现出收缩、嵴减少和膜密度增加等铁死亡特征；(6)TBHP处理导致髓核细胞中椎间盘退变标志蛋白基质金属蛋白酶13的表达增加，Col2A的表达下降。综上，TBHP可诱导髓核细胞发生铁死亡，并促使椎间盘退变的发生，可能是椎间盘退变中的关键病理机制，该研究为开发新型治疗策略提供了潜在靶点。