糖尿病肾病(diabetes nephropathy,DN)为糖尿病最常见和严重的微血管并发症之一,也是导致终末期肾功能衰竭的主要原因。据“美国肾脏资料系统(USRDS)”的统计,超过30%的终末期肾衰(End Stage Renal Failure,ESRF)由糖尿病所致,且ESRF比例在逐年上升。目前我国DN的发病率亦呈上升趋势。2001年中华医学会糖尿病学分会对全国30省市自治区住院病人糖尿病慢性并发症的回顾性分析,糖尿病肾病的患病率为33%。DN的发病机制尚未完全阐明。目前研究认为主要与遗传易感性、蛋白质的非酶糖化、脂质过氧化、肾小球基膜的电荷失衡、NO生成异常、钙代谢紊乱、细胞凋亡及激肽系统激活有关。目前DN的治疗除控制血糖、血压、血脂及优质蛋白外,力求在积极控制诱因的基础上,寻找能阻断DN发生的药物。灯盏花(Erigeronbreviscapus,EB)又名灯盏细辛,为菊科植物短葶飞蓬的全草,为一种植物药,其有效成分为二咖啡酰奎宁酸,焦炔康酸,原二茶酸等黄酮类化合物。临床应用发现灯盏花素能减少DN尿白蛋白含量,对早期糖尿病肾病疗效较好。但未见系统对比研究报道,本实验研究了系统探讨了灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏结构、功能以及肾脏细胞凋亡和氧化应激的影响,从分子生物学角度探讨灯盏花素防治DN的机制,为灯盏花素临床防治DN提供理论依据。 本研究表明：1.糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡增加,早期细胞凋亡主要发生在肾小管,且随病程延长凋亡指数增加。早期肾小球中未见细胞凋亡,肾小球细胞凋亡可能与病程有关。灯盏花素干预一定疗程后能够抑制糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡。灯盏花素能够调节凋亡相关基因bax、bcl-2mRNA的表达减低bax/bcl-2比值。2.糖尿病时大鼠肾脏p47phox基因的mRNA表达水平升高,氧化应激增强;灯盏花素干预降低肾脏p47phox基因的mRNA表达水平,抑制氧化应激。3.灯盏花素能够减少糖尿病大鼠TGF-β1和NF-κB的表达。4.糖尿病大鼠与正常组比较出现肾脏肥大及肾功能恶化的改变。灯盏花素干预可抑制肾脏肥大,增加尿肌酐排泄,降低血尿素氮、血肌酐浓度。病理学检查证实灯盏花素可抑制糖尿病大鼠肾小球系膜增生,减轻肾小球动脉血管的硬化。其原因可能与抑制糖尿病肾脏细胞凋亡、氧化应激及细胞因子NF-κB、TGF-β1的表达有关。 灯盏花素为祖国传统中草药,药用价值高、毒副作用小,目前已临床应用于DN的防治。本研究通过分子生物学与免疫组化方法对链脲佐菌素诱导糖尿病模型组、灯盏花组和正常对照组大鼠肾组织中氧化应激、细胞凋亡及其相关基因和细胞因子表达水平进行检测,探讨灯盏花素对DN发病机制中起重要作用的氧化应激、细胞凋亡和一些细胞因子的影响。研究表明灯盏花素保护肾脏功能的作用与抑制细胞凋亡和氧化应激及TGF-β1和NF-κB的表达有关。为我国传统中草药－灯盏花素防治DN从分子水平提供科学依据、为灯盏花素防治DN提供了有价值的实验资料。 项目研究实施以来,课题组对研究期间的阶段性成果予以总结,先后撰写学术论文10余篇,目前在国内的医学刊物上已发表文章8篇,其中核心期刊2篇,中华牌杂志1篇。待发表文章2篇.通过本项目的研究实施,培养硕士研究生3名,课题组中青年科技人员的科研能力得到显著提高,对人才培养产生了积极而深远的作用。