摘要:
目的 观察胱天蛋白酶14(caspase-14)在慢性光化性皮炎(CAD)患者皮损中的表达以及中波紫外线(UVB)对HaCaT细胞caspase-14 mRNA和蛋白表达的影响.方法 2016年在昆明医科大学第一附属医院皮肤科门诊收集慢性光化性皮炎、湿疹患者皮损各10份作为试验组和阳性对照组,以10例健康人整形手术后的正常皮肤组织作为阴性对照.免疫组化染色检测caspase-14在正常皮肤、CAD及湿疹皮损中的表达.培养HaCaT细胞,分别给予0、30、60、90 mJ/cm2 UVB照射,加或不加甲基化酶抑制剂(5-AzaC)培养24 h后提取细胞,实时荧光定量PCR、Western印迹法检测UVB照射及加入5-AzaC前后HaCaT细胞caspase-14mRNA和蛋白表达水平.采用SPSS22.0软件,率的比较采用卡方检验,组间均数比较采用t检验和双因素方差分析.结果 在CAD和湿疹皮损内,caspase-14主要表达于棘层和颗粒层,角质层不表达;正常皮肤组织角质层中caspase-14表达显著.10例CAD患者中5例皮损caspase-14阳性,10例健康人中9例阳性,两组阳性比例差异有统计学意义(x2=7.30,P<0.05).实时荧光定量PCR及Western印迹检测显示,不同剂量UVB照射后caspase-14mRNA、蛋白的表达差异均有统计学意义(F值分别为87.54、23.46,均P<0.05),caspase-14 mRNA、蛋白的表达随UVB剂量升高有下降趋势.UVB剂量为0、30、60、90 mJ/cm2时,5-AzaC组的caspase-14 mRNA、蛋白的表达均高于UVB照射不加5-AzaC的对照组(均P<0.05).结论 CAD皮损中caspase-14表达降低,角质层不表达;UVB照射可下调HaCaT细胞caspase-14mRNA及蛋白表达水平.