目的：筛查双J管生物被膜阳性菌，通过对其进行耐药率及敏感性差异分析，监测多重耐药情况，以此指导临床抗生素的合理应用。方法收集500例双J管标本，筛选细菌生物膜阳性菌；并通过对其在普通水解酪蛋白（MH）培养基和泊洛沙姆（Poloxamer）培养基上进行耐药率及敏感性差异研究；筛查特殊病原菌的耐药菌株检出情况。结果500例标本中，生物被膜细菌株181例，阳性率为36%。革兰氏阳性菌54株，占30%；革兰氏阴性菌118株，占65%。生物被膜菌在Poloxamer培养基上的耐药性更强(P<0.05)；肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率是23%，耐甲氧西林(MRSA)阳性率40.9%，耐苯唑西林(MRCONS)阳性率65.7%。结论生物被膜阳性菌以革兰氏阴性细菌为主且更易形成生物被膜；生物被膜菌在Poloxamer培养基上表现出更强的耐药性，可以较真实的表现生物被膜菌药物耐受情况；肺炎克雷伯菌是主要的多重耐药菌。