摘要：
目的 (1)建立急性胰腺炎大鼠模型,定性检测Toll-like Receptor 9(TLR 9)在大鼠胰腺的表达、分布情况; (2)定量测定TLR 9在大鼠急性胰腺炎不同时间点的表达变化情况; (3)结合TLR 9在大鼠胰腺的组织分布、表达情况及在雨蛙素诱导性胰腺炎(cerulein-induced pancreatitis,CIP)早期24 h的表达改变,探讨TLR9与CIP发生发展的相关性.方法 (1)采用Wistar大鼠,并随机分配进入实验组或对照组;通过皮下注射雨蛙素建立急性胰腺炎模型; (2)采用免疫组化方法检测TLR 9在正常大鼠胰腺及CIP时大鼠胰腺的表达TLR 9在大鼠胰腺的组织分布情况; (3)提取总RNA,采用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(Quantitative-Real-Time;QRT-PCR)法测定TLR 9基因的表达.(4)分析TLR 9的分布特征及可能的意义(5)统计分析TLR 9 mRNA的表达情况与CIP发生、发展的关系.结果 (1) TLR 9主要分布于胰管上皮、血管内皮和胰岛; (2)外分泌腺泡细胞没有明显的表达; (3) QRT-PCR结果显示TLR 9 mRNA在正常大鼠胰腺组织呈现低水平表达; (4) CIP早期TLR 9 mRNA表达出现快速上调并在1h时达到最高值;TLR 9 mRNA表达在CIP前4h内维持于高水平;其后下降缓慢,至到CIP的第24小时也未降至正常,保持相对较高的表达水平.结论 (1) TLR 9在大鼠胰腺有表达,且表达具有一定的组织特异性; (2) TLR 9在CIP胰腺组织中的表达明显升高,提示TLR 9在胰腺炎早期炎症反应的发生、发展中具有重要作用,与之存在相关性.
