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抗人肺鳞癌单克隆抗体的制备和纯化

Preparation and Purification of the Monoclonal Antibody for Anti-human Lung Squamous Carcinoma

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机构: [1]昆明医科大学第一附属医院中医科云南昆明650032 [2]昆明医科大学第一附属医院临床实验研究中心云南昆明650032
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关键词: 单克隆抗体 抗体纯化 杂交瘤细胞 有限稀释

摘要:
目的 制备并纯化前期工作建立的杂交瘤细胞株C5所分泌的抗人肺鳞癌单克隆抗体,为研究该单抗对应肺癌相关抗原的生物学功能奠定基础.方法 常规培养前期工作建立的C5杂交瘤细胞,有限稀释法进行克隆化培养,ELISA法检测培养上清,挑选检测阳性细胞继续克隆化培养,直至3次检测亚克隆均呈阳性.收集阳性培养上清,利用Protein A-sepharoseCL-4B亲和层析法纯化抗体,Western-Blot法对纯化后的抗体进行鉴定.结果 得到了来源相同的亚克隆杂交瘤细胞株,克隆阳性率达100%.成功纯化出了目的单克隆抗体,并证实纯化产物系目的单抗,纯化后的C5杂交瘤细胞单克隆抗体重链分子量约为75 kDa.结论 成功纯化出抗人肺鳞癌单克隆抗体,该单抗可能在肺癌的早期诊断、靶向治疗和肿瘤疫苗的研制等方面具有重要意义和潜在应用价值.

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第一作者机构: [1]昆明医科大学第一附属医院中医科云南昆明650032
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