摘要：
目的 甲泼尼龙(methylprednisolone,MP)是治疗急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的惟一有效药物,但其作用机制尚未明确.通过观察MP对SCI早期基因表达谱的影响,从基因表达层面探讨其机制.方法 采用重复样本和重复基因芯片检测的方法进行实验.取9只健康成年日本大耳白兔,体重(3 100 ±140)g,随机分为对照组(A组)、模型组(B组)和药物组(C组),每组3只.A组仪进行椎板切除术,B、C组行椎板切除后采用Allen法建立急性SCI模型.C组在造模后2 h按人-兔等效剂量给予大剂量MP冲击治疗,B组注射等量生理盐水,A组不作处理.造模后8 h处死实验动物,分别获取以损伤区为中心长约8 mnl的脊髓组织,采用Trizol法提取总RNA,用9张Agilent兔脊髓组织全基凶4×44 K芯片进行检测.采用GeneSpring11.0统计软件,以P<0.05且倍数变化(fold change,FC)≥2筛选出差异表达基因,并对部分差异表达基因行RT-PCR验证.结果 成功建立SCI动物模型并获得相应的组织标本.各组总RNA质量均能满足基因芯片检测要求.基因芯片结果显示:在SCI早期人剂量MP治疗后许多基因发生表达变化,主要涉及炎症、先天性免疫、离了通道、物质转运和转录因子等,IL-1α、IL-1β和防御素(defensin 4,NP-4)的RT-PCR枪测结果与基因芯片结果相符.其中,先天性免疫相关基因如NP-3、NP-4、皮质素6、内源性抗菌肽CAP-18、抗菌肽等呈现显著的差异性表达.结论 大剂量MP可能主要通过免疫调节机制发挥神经功能保护作用,其主效应细胞可能是中性粒细胞.
