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自噬基因Beclin 1在SKOV3细胞中的表达及其调控相关信号传导途径的研究

Expression of Autophagy Gene Beclin 1 and Involved Signal Transduction Pathway in Ovarian Carcinoma Cell Line SKOV3

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收录情况: ◇ 统计源期刊

机构: [1]昆明医学院第一附属医院妇产科,云南昆明650032 [2]山西医科大学第一临床医学院妇科,山西太原030001 [3]四川大学华西第二医院妇科,四川成都610041
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ISSN:

关键词: Beclin 1 自噬 P13K/PKB SKOV3细胞

摘要:
目的 探讨自噬基因Beclin 1在人卵巢癌SKOV3细胞中过表达后自噬相关信号调控通路P13K/PKB途径中Class Ⅰ P13K(p110 α)、p-PKB和ClassⅢPI3K(hvps34)的表达变化以及对肿瘤细胞的自噬活性的影响.方法 将自噬基凶Beclin 1的真核表达载体pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞;分别用荧光定量RT-PCR和Westem blot在mRNA和蛋白水平检测用流式细胞仪检测Beclinl、p110α、hvps34和p-PKB的表达;在电镜和荧光显微镜下观察自噬现象,用流式细胞仪检肿瘤细胞自噬情况.结果 pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞Beelinl表达在mRNA和蛋白质水平明显高于转染空质粒pcDNA3.1和未转染细胞;PeDNA3.1/Baelin1转染后hvps34表达上调,而p110α、p-PKB的表达下调.PcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后在在电镜下可见大量自噬囊泡形成.在荧光显微镜下见pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞中MDC阳性细胞明显增加.流式细胞仪检测peDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞MDC平均荧光强度高于pcDNA3.1转染组和未转染组.Beclin 1在SKOV3中的过表达后抑制肿瘤细胞在体外的生长,抑制率为58.68%.结论 自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞SKOV3中过表达可使Class Ⅲ P13K(hvps34)表达上调,Class Ⅰ P13K(p110α)及其下游的p-PKB表达下调,诱导肿瘤细胞自噬活性增加,抑制SKOV3在体外的增殖.

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第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医学院第一附属医院妇产科,云南昆明650032
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