摘要:
目的 探究乳腺癌特异性多肽携带外源生物分子进入特定肿瘤细胞的功能.方法 编码乳腺癌细胞特异性多肽(PⅠ)的序列插入质粒pGEX-2T,构建原核表达载体pGEX-2T-PⅠ,表达融合蛋白GST-PⅠ,亲和层析纯化,Western-blot鉴定.GST-PⅠ与人乳腺癌细胞MBA-MB-231体外共培养,免疫荧光检测PⅠ多肽携带GST蛋白的跨膜功能.结果 成功构建pGEX-2T-PⅠ原核表达载体,并在大肠杆菌中表达.融合蛋白占细菌总蛋白量的30%左右,纯化后蛋白纯度约为85%.免疫荧光检测显示,GST-PⅠ能特异性进入MDA-MB-231细胞.结论 乳腺癌特异性多肽PⅠ能够介导融合蛋白GST-PⅠ穿过细胞膜进入MDA-MB-231细胞内.