摘要：
背景:长波紫外线与人体皮肤光老化关系密切,线粒体的损伤是细胞衰老和死亡的分子基础.目的:观察长波紫外线照射对体外培养的皮肤成纤维细胞的线粒体脱氧核糖核酸缺失损伤的影响,以及转化生长因子β1对长波紫外线引起的线粒体DNA缺失有无保护作用.为皮肤光老化研究提供实验依据.设计、时间及地点:实验于2007-03/2008-04于解放军第四军医大学西京医院全军整形外科研究所完成.材料:转化生长因子β1为PerProtech公司产品;线粒体DNA 4 977 bp引物由上海生工合成;长波紫外线光源为北京光学仪器厂生产:紫外线辐照计为北京师范大学光电仪器厂生产.方法:收集20-23岁成年男性包皮环切术后的皮肤组织12例,体外培养成纤维细胞.将细胞分组为对照组、长波紫外线累计照射达到30,60,90 J,cm~2组,半定量PCR检测DNA4 977 bp缺失情况.不同质量浓度转化生长因子β1(0.1,1,1 0μg/L)干预长波紫外线累积照射达90 J/cm~2的皮肤成纤维细胞.主要观察指标:观察不同累积照射剂量产生的DNA 4 977 bp缺失:观察累积照射剂量90 J/cm~2后不同浓度转化生长因子干预对DNA4 977 bp缺失的影响.结果:体外培养的皮肤成纤维细胞经长波紫外线照射,长波紫外线累积剂量为长波紫外线60 J/cm~2后发生线粒体DNA4977 bp缺失,长波紫外线90 J/cm~2时缺失加重.吸光度值和PCR产物电泳及条带密度扫描结果显示,在照射前2 h加入不同剂量转化生长因子处理后,大剂量组(10 μg/L)线粒体DNA表达降低,中、小剂量组与长波紫外线照射组比较,差异无显著性意义.结论:一定剂量(10μg/L)转化生长因子对体外培养的成纤维细胞线粒体DNA缺失起到保护作用.
