摘要：
目的研究两株Wa株人源轮状病毒NSP4蛋白139位氨基酸位点的变异对毒力的影响.方法从2002 ～ 2004年昆明地区婴幼儿轮状病毒感染者大便样品中,通过RT-PCR,PCR扩增了22株轮状病毒株的NSP4 全长基因、cDNA序列,并对cDNA序列测序,发现这些病毒株的NSP4氨基酸序列高度保守,仅在79位、139位氨基酸位点存在差异.选取139位氨基酸不同(V/I)的两株病毒株,在E. coli BL21中,用pGEX5X-1载体融合表达了两株病毒的86 ～ 175位氨基酸(GST-NSP486-175);并酶切融合头得到两种NSP486-175 蛋白,在ICR乳鼠中比较这4种不同蛋白致小鼠腹泻的差异.结果发现GST-NSP486-175蛋白毒性比NSP486-175蛋白强,而139位氨基酸不同(V/I)的两株病毒株的NSP486-175蛋白毒性没有明显的差异.结论 139位氨基酸位点的变异并不影响NSP4蛋白的毒力改变.
