摘要:
目的:基于转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号通路探讨缓激肽对肾小球系膜细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:将大鼠肾小球系膜细胞株(HBZY-1)常规培养。实验分为4组:正常组(细胞正常培养,不加任何药物),模型组(添加5 ng/L TGF-β1),BK组(添加5 ng/LTGF-β1+1 ng/LBK),抑制剂组(添加5 ng/L TGF-β1+1 ng/L TGF-β1特异性抑制剂LY2109761)。EdU标记、流式细胞术、吖啶橙/溴化乙锭(acridineor-ange/ethidium bromide,AO/EB)染色双染法、免疫荧光、Western blot检测各组细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡、细胞中胶原Ⅰ(typeⅠcollagen,ColⅠ)的表达,以及细胞中ColⅠ、TGF-β1、p-Smad2及p-Smad7蛋白的表达水平。数据分析采用SPSS 16.0软件,作图工具采用Graphpad 5.01,多组间比较采用单因素分析,两两比较采用t检验,检验水准α=0.05。结果:与正常组相比,模型组HBZY-1细胞的增殖率(P=0.02)、细胞中ColⅠ(P=0.02)、TGF-β1(P=0.01)、p-Smad2(P=0.02)及p-Smad7(P=0.00)蛋白的表达水平明显升高,细胞凋亡率(P=0.01)明显下降。与模型组相比,BK组和抑制剂组细胞的增殖率(P=0.01)、细胞中ColⅠ(P=0.01)、TGF-β1(P=0.01)、p-Smad2(P=0.00)蛋白的表达水平明显下降,细胞凋亡率(P=0.02)、p-Smad7蛋白(P=0.02)的表达水平明显增加。结论:缓激肽通过抑制TGF-β1/Smad信号通路调控肾小球系膜细胞的增殖、凋亡和细胞周期等生理过程。