目的分析2018—2020年多中心临床分离主要病原菌对诺酮类药物的耐药性。方法对国内主要地区11所三级医院临床分离菌株,按2020年CLSI文件统一进行抗菌药物敏感性试验并判断结果。结果近3年多中心耐药监测共收集临床分离菌215299株,分离前10位病原菌分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、屎肠球菌、粪肠球菌、表皮葡萄球菌、嗜麦芽窄食单胞菌和阴沟肠杆菌。大肠埃希菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为65.3%和56.9%;其它肠杆菌目细菌对喹诺酮类药物的耐药率均在50%以下;肠道感染沙门菌属对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为20.2%和12.6%;志贺菌属对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率41.2%和33.3%。鲍曼不动杆菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率为79.9%和59.7%。葡萄球菌属中凝固酶阴性葡萄球菌对喹诺酮类药物耐药率均较高,屎肠球菌耐药率明显高于粪肠球菌。肺炎链球菌对莫西沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为1.6%和3.3%。未检出对莫西沙星、左氧氟沙星耐药的流感嗜血杆菌。结论喹诺酮类药物对大多数病原菌具有较好抗菌活性,但大肠埃希菌及肠道感染沙门菌敏感性较低,应加强医院感染防控措施和抗菌药物临床应用管理措施。