目的分析昆明医科大学第一附属医院无菌体液中分离出的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）的临床分布情况和耐药性,为临床抗菌药物的合理使用提供依据。方法采用标准纸片法或仪器法,按照统一技术方案,鉴定并完成细菌耐药性检测。药敏结果依据CLSI2020标准进行判读,数据分析用WHONET5.6完成。对表型确定的CRE菌株进行测序分析,确定基因型。结果无菌体液中共分离出46株CRE,其中肺炎克雷伯菌43株,大肠埃希菌1株,产气克雷伯菌1株,阴沟肠杆菌1株。耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌中检出携带blaKPC基因32株、blaOXA-48基因7株、blaIMP基因1株,检出同时携带blaKPC、blaOXA-48基因2株,检出未携带blaKPC、blaOXA-48、blaNDM、blaIMP、blaVIM基因的菌株1株。46株CRE除对碳青霉烯类抗菌药物耐药外,也对β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、磷霉素等抗菌药物耐药,未发现对替加环素耐药的菌株。结论无菌体液中分离的CRE以肺炎克雷伯菌为主,酶型以KPC为主,有多种耐药基因同时存在的情况,对常用抗菌药物普遍耐药。医院需加强对CRE的防控,实验室应结合自身条件及临床需求开展碳青霉烯酶型的检测。