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fam83b对肝癌细胞的作用及机制研究

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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心

机构: [1]昆明医科大学第一附属医院感染与肝病科 [2]昆明医科大学第四附属医院(云南省第二人民医院)肝脏疾病研究中心
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关键词: 肝癌细胞 FAM83B PI3K/Akt/mTOR信号通路 增殖 侵袭 凋亡

摘要:
目的 探讨具有序列相似性的家族83成员B(FAM83B)对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)、Western blotting、免疫组织化学法检测肝癌组织、癌旁正常组织、人类肝癌细胞系(HepG2、Hep3B)、正常人类肝细胞系(LO2)中FAM83B mRNA和蛋白的表达。采用靶向siRNA敲低HepG2细胞系中FAM83B作为si-FAM83B组,HepG2细胞转染si-NC慢病毒载体作为siNC组。分别用PBS、40 ng/mL胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理si-FAM83B组细胞48 h,并将细胞分为siFAM83B+PBS组和si-FAM83B+IGF-1组,分析敲低FAM83B对肝癌细胞增殖、侵袭、细胞周期和凋亡的影响,并研究敲低FAM83B对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素哺乳动物靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响。结果 肝癌组织FAM83B m RNA和蛋白相对表达量高于癌旁正常组织(P <0.05)。HepG2、Hep3B细胞FAM83B mRNA和蛋白相对表达量高于LO2细胞(P <0.05)。si-FAM83B组FAM83B mRNA和蛋白相对表达量低于si-NC组(P <0.05)。si-NC组与si-FAM83B组24 h、48 h、72 h、96 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点OD值有差异(F=773.510,P=0.001);(2)si-NC组与si-FAM83B组的OD值有差异(F=516.980,P=0.000),si-FAM83B组OD值较低;(3)两组OD值变化趋势有差异(F=820.782,P=0.000)。si-FAM83B组细胞凋亡率高于si-NC组,侵袭细胞数低于si-NC组(P <0.05)。si-FAM83B组PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量低于si-NC组(P <0.05),LC3-Ⅱ高于si-NC组(P <0.05)。si-NC组与siFAM83B组Akt、mTOR蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。si-FAM83B+IGF-1组PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量高于si-FAM83B+PBS组(P <0.05),LC3-Ⅱ低于si-FAM83B+PBS组(P <0.05)。si-FAM83B+PBS组与si-FAM83B+IGF-1组Akt、mTOR蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。si-FAM83B+PBS组与si-FAM83B+IGF-1组24 h、48 h、72 h、96 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点OD值有差异(F=5211.626,P=0.000);(2)si-FAM83B+PBS组与siFAM83B+IGF-1组OD值有差异(F=453.499,P=0.000),si-FAM83B+IGF-1组OD值较高;(3)两组OD值变化趋势有差异(F=384.347,P=0.000)。si-FAM83B+IGF-1组细胞凋亡率低于si-FAM83B+PBS组(P <0.05),侵袭细胞数高于si-FAM83B+PBS组(P <0.05)。结论 敲低FAM83B可通过沉默PI3K/Akt/mTOR通路抑制肝癌细胞生长,并促进肿瘤细胞自噬。

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第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医科大学第一附属医院感染与肝病科
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