目的 分析昆明医科大学第一附属医院住院的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌（CRE）定植与感染者临床特征、耐药情况和危险因素，为预防CRE感染提供依据。方法 收集昆明医科大学第一附属医院2021年1—11月主动筛查CRE定植阳性患者的临床资料和耐药状况，对同种CRE定植和感染患者菌株进行多位点序列分型（MLST）,其中CRE肠道外感染者作为病例组，未发生CRE肠道外感染者作为对照组，并通过单因素分析对比两组之间差别，多因素Logistic分析对CRE感染者所引起的独立危险因素。结果 3 116例中主动筛查CRE定植阳性的患者检出CRE 73株，检测阳性率为2.34%,其中耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌63株（86.30%）、耐碳青霉烯大肠埃希菌8株（10.96%）、耐碳青霉烯阴沟肠杆菌2株（2.74%）。尚未出现对多黏菌素和替加环素耐药的菌株，对阿米卡星、复方磺胺甲噁唑、庆大霉素等部分敏感，对其他抗菌药物的耐药率为100.0%。病例组31株发生定植后的CRE感染，感染部位以下呼吸道感染为主，其次为血液、尿路。对病例组CRE定植后发生感染耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌30株配对MLST检测，为ST11（23/30）和ST231（7/30）两种型。通过多因素Logistic分析发现，中心静脉置管、使用质子泵抑制剂、有多重耐药菌感染史是CRE感染的独立危险因素（P＜0.05）。结论 主动筛查在CRE防控中具有重要意义，中心静脉置管、使用质子泵抑制剂、有多重耐药菌感染史是CRE感染的独立危险因素，应加强对易感患者的监控。