目的 分析碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP）T361株的耐药及毒力基因携带情况。方法 肺炎克雷伯菌T361株分离自昆明医科大学第一附属医院干部医疗科患者的痰液标本。采用Vitek-2 compact系统对菌株进行鉴定和药物敏感性试验。使用PCR检测菌株的耐药基因。并用Illumina Hiseq 4000高通量测序平台对其进行全基因组测序，分析菌株携带的耐药及毒力基因。结果 肺炎克雷伯菌T361株对头孢菌素类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、氟诺喹酮类、磺胺类、β内酰胺/β内酰胺酶抑制剂复合物、呋喃妥英及替加环素等抗生素均耐药。PCR检出blaKPC-2、blaTEM、blaSHV及blaCTX等耐药基因。全基因组测序得到1条完整的基因组序列（GenBank登录号：CP053016）及4条质粒序列（GenBank登录号：CP053017、CP053018、CP053019、CP053020）。在染色体基因组中发现，有44种耐药相关基因，包括blaSHV-11、ompK36、ompC、ompK37、lamB等；有50多种毒力基因，包括fimD、mrkC、mrkD、ybtE、ybtT等。在质粒1（pKPN361-1）中发现了4种耐药基因，包括blaCTX-M-65、blaTEM-1、rmtB和blaKPC-2;质粒2（pKPN361-2）中发现了6种耐药基因，包括tet（A）、sul1、mphA、aph（3′）-Ia、blaLAP-2和aac（3）-IId;质粒3（pKPN361-3）和质粒4（pKPN361-4）中未检测到耐药基因，并且4个质粒中均未发现毒力基因。结论 碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T361株中携带了大量耐药及毒力基因且产酶耐药基因位于质粒上，造成其易传播，临床上须引起高度重视。