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丙泊酚调节mpp+诱导的sh-sy5y细胞线粒体氧化应激和凋亡

Propofol Regulates MPP+-induced Mitochondrial Oxidative Stress and Apoptosis in SH-SY5Y Cells

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊

机构: [1]昆明医科大学第一附属医院麻醉科,云南昆明 650032 [2]昆明市延安医院泌尿外科,云南昆明 650051
出处:

关键词: 帕金森 氧化应激 1-甲基-4-苯基吡啶离子 丙泊酚

摘要:
目的探讨不同浓度的丙泊酚(propofol, PPF)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)诱导的帕金森(Parkinson’s disease, PD)模型细胞氧化应激和凋亡的作用。方法 利用1 mM MPP+诱导人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y构建PD细胞模型。PPF处理组分别用10、20、40、80μM PPF在MPP+诱导前刺激SH-SY5Y细胞4 h。细胞计数法(cell counting kit-8,CCK-8)评估细胞增殖活力。2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2DCF-DA)荧光探针用于检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)。试剂盒分别检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase,NADPH)氧化酶的水平。Western blot用于检测线粒体和细胞质中细胞色素c的蛋白表达以及细胞中Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达。流式细胞术分析细胞凋亡率。结果 MPP+诱导明显抑制SH-SY5Y细胞的增殖(P <0.001),促进细胞中ROS(P <0.001)、MDA(P <0.001)、NADPH氧化酶(P <0.01)、细胞质中细胞色素c的表达(P <0.01)并诱导细胞凋亡(P <0.001)以及促凋亡蛋白Bax和Cleaved caspase-3的表达(P <0.01),减少线粒体中细胞色素c的蛋白表达(P <0.01)和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P <0.01)。PPF预处理可缓解MPP+诱导引起的SH-SY5Y细胞增殖抑制以及氧化应激和凋亡的促进作用(P <0.001),且40μM和80μM对细胞的作用更为显著。结论 PPF预处理可缓解MMP+诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激,减少细胞凋亡。

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第一作者机构: [1]昆明医科大学第一附属医院麻醉科,云南昆明 650032
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