摘要：
目的 利用过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)构建体外氧化应激细胞模型.方法 H2O2分6个浓度梯度处理HUVECs不同时间,倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA荧光探针和流式细胞仪检测细胞内活性氧水平,筛选H2O2的最佳作用浓度和时间.结果 不同浓度H2O2处理细胞不同时间,对HUVECs均有损伤作用;400、600、800μmol/L H2O2处理HUVECs 24 h,细胞存活率显著降低(P<0.05),800μmol/L H2O2作用HUVECs不同时间,细胞存活率随处理时间延长逐渐降低(P<0.01);各组H2O2处理HUVECs 24 h,细胞凋亡率显著增加(1 000μmol/L除外,P<0.05),坏死率亦显著增加(100μmol/L除外,P<0.05);800μmol/L H2O2处理HUVECs不同时间,细胞凋亡率随处理时间延长逐渐增加,24 h时达到最高(P<0.05),细胞坏死率亦逐渐增加,48 h时达到最高(P<0.05);各组H2O2作用HUVECs 24 h,浓度400μmol/L时,细胞内ROS水平达到最高(P<0.01),800μmol/L H2O2处理HUVECs,胞内ROS水平随处理时间延长而递增(P<0.01).结论800μmol/L H2O2与HUVECs作用24 h可构建体外细胞氧化应激模型.
