摘要：
目的:探索建立稳定有效的脐静脉内皮细胞体外培养方法.方法:用0.1％Ⅱ型胶原酶消化分离人脐静脉内皮细胞,加入含内皮细胞生长因子的M199完全培养液中培养,用胰蛋白酶-EDTA进行消化传代培养,用光镜和免疫组化方法对培养的细胞进行形态观察和鉴定.结果:原代培养的内皮细胞在接种后24 h后完全贴壁生长,第4～5天后融合呈铺路石样镶嵌排列,免疫组化可见胞浆中第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应,证实培养的细胞为内皮细胞.结论:脐静脉灌注Ⅱ型胶原酶消化法配合M199完全培养液可获得高纯度的内皮细胞,细胞可传代5-6次,但细胞产出量不高,不能传10代以上,5代以后细胞形态变化较大,对于复杂的基础研究应用受限.
