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胎鼠脊髓神经干细胞的分离培养、鉴定与诱导分化

Isolation, culture and identification of spinal cord-derived neural stem cells

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-E

机构: [1]华中科技大学附属协和医院神经外科 湖北武汉 430022 [2]昆明医学院第一附属医院神经外科 云南昆明 650032 [3]卫生部中日友好医院神经外科 北京 100029
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ISSN:

关键词: 神经干细胞 脊髓 大鼠 细胞培养

摘要:
目的 探讨胚胎大鼠脊髓神经干细胞分离、培养、传代及鉴定的方法.方法显微解剖分离E14d胚胎大鼠脊髓组织,用机械吹打法制成单细胞悬液,接种于含有表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bF-GF)及N2的DMEM/F12(1:1)无血清培养基中培养,待形成克隆球后进行传代培养.取第3代培养的细胞分别进行Nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定.结果 E14d胚胎大鼠脊髓组织细胞培养72h后可形成悬浮生长的神经球,7~10d后即可传代.经传代扩增后得到大量同源的Nestin免疫阳性的细胞克隆球,经诱导分化后大部分细胞分化为GFAP免疫阳性的星形胶质细胞和CNPase免疫阳性的少突胶质细胞,少量细胞分化为β-Ⅲ-tubulin免疫阳性的神经元.结论成功从胚胎大鼠脊髓组织中分离出神经干细胞,为进一步开展脊髓疾病的细胞移植治疗研究奠定了基础.

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第一作者:
第一作者机构: [1]华中科技大学附属协和医院神经外科 湖北武汉 430022
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