资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型:
机构:
[1]华中科技大学附属协和医院神经外科 湖北武汉 430022
华中科技大学同济医学院附属协和医院
[2]昆明医学院第一附属医院神经外科 云南昆明 650032
外科科室
神经外科
昆明医科大学附属第一医院
[3]卫生部中日友好医院神经外科 北京 100029
出处:
ISSN:
关键词:
神经干细胞
脊髓
大鼠
细胞培养
摘要:
目的 探讨胚胎大鼠脊髓神经干细胞分离、培养、传代及鉴定的方法.方法显微解剖分离E14d胚胎大鼠脊髓组织,用机械吹打法制成单细胞悬液,接种于含有表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bF-GF)及N2的DMEM/F12(1:1)无血清培养基中培养,待形成克隆球后进行传代培养.取第3代培养的细胞分别进行Nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定.结果 E14d胚胎大鼠脊髓组织细胞培养72h后可形成悬浮生长的神经球,7~10d后即可传代.经传代扩增后得到大量同源的Nestin免疫阳性的细胞克隆球,经诱导分化后大部分细胞分化为GFAP免疫阳性的星形胶质细胞和CNPase免疫阳性的少突胶质细胞,少量细胞分化为β-Ⅲ-tubulin免疫阳性的神经元.结论成功从胚胎大鼠脊髓组织中分离出神经干细胞,为进一步开展脊髓疾病的细胞移植治疗研究奠定了基础.
基金:
教育部留学回国人员科研启动基金(教外司留[2002]247号)
第一作者:
第一作者机构:
[1]华中科技大学附属协和医院神经外科 湖北武汉 430022
推荐引用方式(GB/T 7714):
雷德强,赵洪洋,邓兴力,等.胎鼠脊髓神经干细胞的分离培养、鉴定与诱导分化[J].中风与神经疾病杂志.2008,25(3):265-268.