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Nurr1对小胶质细胞联合神经干细胞共培养促进神经干细胞向多巴胺神经元分化作用研究

Effect of nuclear receptor-related factor 1 on differentiation of neural stem cells into dopaminergic neurons in the co-culture system of neural stem cells and microglial cells

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资源类型:
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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心

机构: [1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南省昆明市,650032
出处:
ISSN:

关键词: 神经干细胞和小胶质细胞共培养 核受体相关因子1基因 多巴胺神经元 细胞分化 帕金森病 大鼠

摘要:
目的 探讨联合过表达核受体相关因子1(Nurr1)基因的小胶质细胞(MC)和神经干细胞(NSC)共培养对神经干细胞向多巴胺神经元分化的影响.方法 原代培养SD大鼠神经干细胞和小胶质细胞,并过表达Nurr1基因.CCK-8法检测Nur1过表达对神经于细胞以及小胶质细胞活率的影响.Transwell系统共培养神经干细胞和小胶质细胞,实验分为NSC组、NSC+ MG组和N(NSC+ MG)组.ELISA检测共培养后第3天、第6天和第9天各组脑源性神经营养因子(BD-NF)、血小板源性神经营养因子(PDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达变化;RT-PCR和Western Blot检测各组第9天酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT) DAT和Nur1的表达变化;细胞免疫荧光鉴定神经干细胞的分化,并对TH和DAT阳性细胞计数,计算各组神经干细胞向多巴胺神经元的分化效率.结果 原代培养小胶质细胞以及神经干细胞并成功过表达Nur1基因.CCK-8法检测结果表明,Nur1过表达对神经干细胞以及小胶质细胞活率无明显影响.ELISA检测结果表明,N(NSC+ MG)组在不同时间点神经营养因子(BDNF、PDNF和GDNF)表达量明显高于其他各组(P<0.05).RT-PCR和Westen Blot检测结果表明,N(NSC+ MG)组TH、DAT和Nur1的表达水平明显高于其他各组(P<0.05).细胞免疫荧光鉴定结果表明,N(NSC+ MG)组TH阳性细胞率明显高于其他各组(P<0.05).结论 Nur1基因可促进神经干细胞和小胶质细胞共培养系统神经营养因子的分泌.过表达Nur1基因的神经干细胞和小胶质细胞共培养可促进神经干细胞向多巴胺神经元的分化.

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第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南省昆明市,650032
通讯作者:
通讯机构: [1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南省昆明市,650032
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