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小胶质细胞与神经干细胞共同培养对神经干细胞向多巴胺能神经元分化的影响

Impact of co-cultured microglia and neural stem cells via transwell on differentiation from neural stem cells into dopaminergic neurons

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文献详情

资源类型：

收录情况： ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-E ◇ 中华系列

作者：
王威[1] * ; 李俊君[1] ; 林海[1] ; 徐蛟天[1] ; 陈孝祥[1] ; 宋晓斌[1] ; 杨智勇[1] ; 邓兴力[1] ;
机构： [1]昆明医科大学第一附属医院神经外科, 昆明,650032
出处：
DOI： 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2018.04.003
ISSN：

关键词： 神经干细胞 小胶质细胞 共同培养 多巴胺能神经元

摘要：
目的 探讨小胶质细胞与神经干细胞(NSCs)共同培养条件下对NSCs向多巴胺能神经元分化的促进作用. 方法 (1)原代培养新生SD大鼠的小胶质细胞并鉴定.原代培养孕14dSD大鼠胚胎NSCs并鉴定.(2)取鉴定后细胞分为NSCs单独培养组和小胶质细胞与NSCs共同培养组.2组细胞培养6d后,采用细胞免疫荧光法及Westem blotting实验检测多巴胺能神经元分化与成熟相关因子酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运体(DAT)及炎症因子3(Pitx3)蛋白的表达,采用PCR技术检测2组细胞TH、DAT以Pitx3基因转录水平的差异. 结果 (1)新生SD大鼠小胶质细胞CD 11 b/c染色阳性,所得到的小胶质细胞纯度＞95％.孕14 d SD大鼠NSCs巢蛋白染色阳性.(2)细胞免疫荧光染色结果显示:与单独培养组比较,共同培养组NSCs TH、DAT及Pitx3阳性蛋白明显增多.Westem blotting实验结果显示:共同培养组细胞TH、DAT以及Pitx3蛋白的表达量明显高于单独培养组,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)PCR实验结果显示:共同培养组TH、DAT以及Pitx3基因转录水平均明显高于单独培养组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 小胶质细胞与NSCs共同培养可促进NSCs向多巴胺能神经元分化.

基金：
国家自然科学基金(81241126)国家自然科学基金地区科学基金(81360197)云南省教育厅科学研究基金(2013C227)云南省干细胞与再生医学重点实验室开放课题(201401UH00160)National Natural Science Foundation of China(81241126)%Regional Science Foundation of National Natural Science Foundation of China(81360197)%Scientific Research Foundation of Education Administration of Yunnan Province(2013C227)%Open Projects from Yunnan Provincial Key Laboratory on Stem Cells and Regenerative Medicine(201401UH00160)
语种：
中文
第一作者：
第一作者机构： [1]昆明医科大学第一附属医院神经外科, 昆明,650032
通讯作者：
通讯机构： [1]昆明医科大学第一附属医院神经外科, 昆明,650032
推荐引用方式(GB/T 7714)：
王威,李俊君,林海,等.小胶质细胞与神经干细胞共同培养对神经干细胞向多巴胺能神经元分化的影响[J].中华神经医学杂志.2018,17(4):337-343.

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