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GFP-Nurr1基因修饰神经干细胞的建立及过表达Nurr1对神经干细胞向多巴胺神经元分化的影响

Establish the GFP-Nurr1 modified NSCs and the impact on the differentiation of neural stem cells by Nurr1 Overexpression

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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心

机构: [1]昆明医科大学第一附属医院神经外科,云南 昆明,650032
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关键词: Nurr1 基因修饰 慢病毒 神经干细胞

摘要:
目的 利用慢病毒载体建立GFP-Nurr1基因修饰的原代神经干细胞(NSCs)模型并观察Nurr1过表达后NSCs向多巴胺神经元的分化影响.方法 利用基因重组构建pLenO-DCE-Nurr1慢病毒载体,用慢病毒转染第三代NSCs,转染72 h后荧光检测转染效果;设置空白对照组、空载体组及DCE-Nurr1组,分别用Western blot及PCR检测Nurr1的表达差异;并将转染后的NSCs分化培养7d后分别用免疫细胞化学检测、Western blot及PCR检测酪氨酸羟化酶(TH)的表达.结果 慢病毒转染NSCs72h后,转染率可达90%,与对照组相比DCE-Nurr1组高表达Nurr1.经慢病毒载体感染后的NSCs仍具备分化潜能,分化培养后发现DCE-Nurr1组分化的神经细胞中TH阳性细胞分化率90.60%,对照组为21.2%.结论 慢病毒载体可高效转染NSCs过表达Nurr1;Nurr1基因过表达可以促进中脑腹侧来源NSCs向TH阳性多巴胺能神经元方向分化.

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第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医科大学第一附属医院神经外科,云南 昆明,650032
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