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◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型：
机构：
[1]昆明医学院第一附属医院神经外科 云南昆明 650032
外科科室
神经外科
昆明医科大学附属第一医院
[2]中日友好医院神经外科 北京 100029
[3]中日友好医院放射诊断科 北京 100029
[4]华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科 湖北武汉 430022
华中科技大学同济医学院附属协和医院
[5]中日友好医院临床医学研究所 北京 100029
出处：
ISSN：
关键词：
脑源性神经营养因子基因
重组质粒
中脑神经干细胞
基因转染
摘要：
目的 建立脑源性神经营养因子(GDNF)基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞.方法以RT-PCR扩增GDNF基因编码序列,将其克隆至质粒pEGFPN1构建重组质粒pEGFPN1一GDNF,经酶切鉴定及序列分析后,以FuGENE HD转染试剂介导转染大鼠胚胎中脑神经干细胞.免疫细胞化学、western blot鉴定GDNF的表达,诱导分化后免疫细胞化学鉴定其分化能力.结果 RT-PCR产物为650bp的特异片段,重组质粒pEGFPN1-GDNF经酶切产生650bp和4.7kb的片段,序列分析结果与文献报道一致.免疫细胞化学、western blot表明GDNF基因修饰细胞能正确表达GDNF且基因修饰不影响其增殖与分化.结论建立GDNF基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞,为进一步应用其开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础.
第一作者：
第一作者机构：
[1]昆明医学院第一附属医院神经外科 云南昆明 650032
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
邓兴力,刘如恩,郭京,等.GDNF基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞的建立[J].中风与神经疾病杂志.2008,25(3):260-264.
