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SPIO、GFP双标BDNF基因修饰中脑神经干细胞的研究

Establishment of midbrain neural stem cells modified with brain-derived neurotrophic factor gene double-labeled by superparamagnetic iron oxide and green fluorescence protein

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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心

机构: [1]昆明医学院第一附属医院神经外科650032 [2]中日友好医院神经外科北京100029
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关键词: 神经干细胞 超顺磁性氧化铁 绿色荧光蛋白 脑源性神经营养因子

摘要:
目的 建立超顺磁氧化铁(SPIO)、绿色荧光蛋白(GFP)双标脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰中脑神经干细胞.方法 以质粒pcDNA3-BDNF、pEGFPN1共转染第3代大鼠胚胎中脑神经干细胞,并用SPIO标记.荧光显微镜检测GFP的表达;免疫细胞化学、Western blot鉴定BDNF的表达;普鲁士蓝染色、透射电镜鉴定SPIO标记.结果 GFP在基因转染12 h后开始表达,24h明显增加,48h达顶峰.免疫细胞化学、Western blot表明:细胞成功表达BDNF.普鲁士蓝染色显示:SPIO标记的中脑神经干细胞内有大量蓝染铁颗粒,细胞标记率达100%.透射电镜显示:SPIO颗粒位于吞饮小泡和细胞质内.结论 成功建立SPIO、GFP双标BDNF基因修饰中脑神经干细胞,为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础.

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第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医学院第一附属医院神经外科650032
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