摘要：
目的 探索建立稳定有效的原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)体外培养方法,并比较原代HU-VECs与HUVEC-CS、EA.hy926细胞株之间的表面抗原表达情况.方法 Ⅱ型胶原酶消化人脐静脉分离HUVEC,M199完全培养液培养,HUVEC-CS及EA.hy926用DMEM完全培养液.胰蛋白酶消化传代,对三种细胞进行形态学观察,流式细胞仪分析比较表面抗原的表达率.结果 原代HUVECs细胞为多角形,“铺路石样”排列;HUVEC-CS和EA.hy926细胞为圆形或扁平形,生长速度快,呈典型“鹅卵石状排列.vWF因子免疫荧光染色:原代HUVECs 及EA.hy926大部分细胞内可见绿色荧光,而HUVEC-CS为阴性.流式细胞仪分析原代HUVECs(77.7％)或EA.hy926(78.6％)CD31表达率明显高于HUVEC-CS(4.2％),原代HUVECs CD34表达率(43.3％)明显高于HUVEC-CS或EA.hy926(分别为1.6％、0.2％),差异有统计学意义.结论 脐静脉灌注Ⅱ型胶原酶消化法配合M199完全培养液可获得高纯度的内皮细胞,EA.hy926永生细胞株培养方法简单,短时间内可获得足够数量的细胞,两者均是组织工程及相关医学基础研究较好的细胞来源.
