资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
文章类型:
作者:
徐蛟天[1,2,3]
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边立功[2]
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张琰[1,2,3]
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王威[1,2,3]
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陈孝祥[1,2,3]
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陈鑫月[1,2,3]
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李庆[1,2,3]
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邓兴力[1,2,3]
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机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南 昆明,650032
外科科室
神经外科
神经外一科(神经外科)
昆明医科大学附属第一医院
[2]昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,云南 昆明,650500
[3]昆明医科大学第一附属医院神经内科,云南 昆明,650032
内科科室
神经内科
昆明医科大学附属第一医院
[4]昆明医科大学,云南 昆明,650500
出处:
ISSN:
关键词:
小胶质细胞
细胞培养
细胞纯化
摘要:
目的 建立一种简易高效的新生大鼠小胶质细胞的原代培养和纯化方法,提高小胶质细胞的产量以及纯度.方法 在传统Miriam Mecha的混合胶质细胞培养方法的基础上通过改良操作,混合培养小胶质细胞,并分别采用手拍法、摇床法以及温和胰酶消化法,纯化小胶质细胞,通过差速贴壁进一步纯化细胞.荧光显微镜下标记小胶质细胞的特异性标记物Iba1、CD11b/c进行鉴定.结果 (1)分离培养第1天小胶质细胞呈不规则圆形,折光不均匀,继续培养3~5d,小胶质细胞逐渐出现单极或多极突起,7d时部分细胞转为静止状态,呈分枝状;(2)纯化后小胶质细胞多呈静息状态,细胞免疫荧光CD11b/c、Iba1双阳性;(3)不同纯化方法细胞免疫荧光并计数显示:手拍法纯化小胶质细胞,细胞阳性率( >96%)明显高于胰酶消化法( >90%,P<0.05),前者细胞产量明显高于摇床法(P<0.05).结论 通过改良传统Miriam Mecha的混合小胶质细胞的培养和纯化方法,可以提高小胶质细胞产量以及纯度.
基金:
国家自然科学基金(81241126,81360197)
基金编号:
81241126,81360197
第一作者:
第一作者机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南 昆明,650032
[2]昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,云南 昆明,650500
[3]昆明医科大学第一附属医院神经内科,云南 昆明,650032
通讯作者:
通讯机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南 昆明,650032
[2]昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,云南 昆明,650500
[3]昆明医科大学第一附属医院神经内科,云南 昆明,650032
推荐引用方式(GB/T 7714):
徐蛟天,边立功,张琰,等.一种原代小胶质细胞培养与纯化方法的改良[J].中风与神经疾病杂志.2018,35(02):115-118.