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一种原代小胶质细胞培养与纯化方法的改良

A modified method of microglia culturation and purification

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资源类型:
WOS体系:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心

机构: [1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南 昆明,650032 [2]昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,云南 昆明,650500 [3]昆明医科大学第一附属医院神经内科,云南 昆明,650032 [4]昆明医科大学,云南 昆明,650500
出处:
ISSN:

关键词: 小胶质细胞 细胞培养 细胞纯化

摘要:
目的 建立一种简易高效的新生大鼠小胶质细胞的原代培养和纯化方法,提高小胶质细胞的产量以及纯度.方法 在传统Miriam Mecha的混合胶质细胞培养方法的基础上通过改良操作,混合培养小胶质细胞,并分别采用手拍法、摇床法以及温和胰酶消化法,纯化小胶质细胞,通过差速贴壁进一步纯化细胞.荧光显微镜下标记小胶质细胞的特异性标记物Iba1、CD11b/c进行鉴定.结果 (1)分离培养第1天小胶质细胞呈不规则圆形,折光不均匀,继续培养3~5d,小胶质细胞逐渐出现单极或多极突起,7d时部分细胞转为静止状态,呈分枝状;(2)纯化后小胶质细胞多呈静息状态,细胞免疫荧光CD11b/c、Iba1双阳性;(3)不同纯化方法细胞免疫荧光并计数显示:手拍法纯化小胶质细胞,细胞阳性率( >96%)明显高于胰酶消化法( >90%,P<0.05),前者细胞产量明显高于摇床法(P<0.05).结论 通过改良传统Miriam Mecha的混合小胶质细胞的培养和纯化方法,可以提高小胶质细胞产量以及纯度.

基金:

基金编号: 81241126,81360197

语种:
第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南 昆明,650032 [2]昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,云南 昆明,650500 [3]昆明医科大学第一附属医院神经内科,云南 昆明,650032
通讯作者:
通讯机构: [1]昆明医科大学第一附属医院神经外一科,云南 昆明,650032 [2]昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,云南 昆明,650500 [3]昆明医科大学第一附属医院神经内科,云南 昆明,650032
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