资源类型:
作者:
李俊[1,2]
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王剑松[1,2]
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肖桦[1,2]
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王海峰[1,2]
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詹辉[1,2]
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王春晖[1,2]
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黎承萍[1,2]
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李艳锋[1,2]
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韩冰冰[1,2]
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李晔[1,2]
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王茜[1,2]
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机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院
[2]昆明医科大学第二附属医院
获奖:
云南省卫生科技成果奖·二等奖
获奖时间:2014
关键词:
膀胱癌
改良型TAT-Apoptin
表达纯化
抗癌效应
凋亡
摘要:
该课题的基本内容及特点:(1)、利用新型质粒PGEX-6P-1作为原核表达载体构建改良型TAT-Apoptin融合蛋白表达质粒。对凋亡素分子进行小型化改造,构建改良型TAT-凋亡素融合蛋白基因,在减弱其免疫原性的同时保留了较好的抗肿瘤效应。(2)、将改良型TAT-Apoptin融合蛋白构建入真核表达载体中并转染膀胱癌细胞株,观察膀胱癌细胞的凋亡情况。既降低其免疫原性,又提高其向细胞内转运的效率。(3)、利用脂质体将荧光素酶表达载体pGL4.17(luc2/neo)转染至人膀胱癌细胞株BIU-87,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆。根据体外生物发光情况及细胞的生长特性,从中挑选合适克隆,接种于机械损伤后的裸鼠膀胱内,建立膀胱癌原位动物模型。(4)、采用红外激光扫描成像系统动态观测体内肿瘤的生长、转移、扩散及治疗效果等情况。这在国内属前沿技术。(5)、观察在不同给药途径下改良型TAT-Apoptin融合蛋白对机体的毒性作用以及其诱发的免疫反应对机体的影响;探讨改良型TAT-Apoptin融合蛋白治疗膀胱癌的最佳给药途径及其抗肿瘤治疗机理。(6)、对肿瘤组织采用流式细胞仪、western Blot测定肿瘤DNA含量、细胞凋亡等,计算肿瘤生长抑制率并观察膀胱癌转移途径。观察改良型TAT-Apoptin融合蛋白对荷瘤膀胱癌裸鼠的生存质量的影响。、评估改良型TAT-Apoptin融合蛋白临床应用的可行性,并判断其临床应用前景。该项目的应用推广情况:改良型TAT-Apoptin融合蛋白应用于膀胱癌临床治疗的技术已在昆明医科大学第一附属医院、昆明医科大学第二附属医院、云南省肿瘤医院、大理医学院附属医院、昆明市延安医院、昆明市第一人民医院、怒江州人民医院、曲靖市第一人民医院、西双版纳州医院、昭通市永善县人民医院、大理州祥云县人民医院等多家医院推广应用,临床效果较好,证实了该技术具有良好的临床应用前景。