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面神经损伤后脑内移植神经干细胞的MRI示踪及面神经元凋亡的1H-MRS研究

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资源类型:
机构: [1]昆明医学院第一附属医院 [2]云南省人口和计划生育科学技术研究所

获奖: 云南省卫生科技成果奖·三等奖 获奖时间:2012

关键词: 面神经 损伤 神经元 凋亡 神经干细胞 磁共振成像 氢质子磁共振波谱

摘要:
本研究中使用的主要技术包括:MRI示踪超顺磁性氧化铁粒子(SPIO)标记神经干细胞(NSCs)技术和1H-MRS技术。 MRI示踪超顺磁性氧化铁粒子(SPIO)标记神经干细胞(NSCs)技术是将SPIO标记的NSCs移植入体内,用MRI对移植的干细胞行动态、连续、无创的活体观察,该方法已被许多研究证实可以用来对移植的干细胞进行示踪。主要技术性能指标为:由于SPIO标记的NSCs在MRI上显示为低信号,因此用MRI观察这种低信号的存在及变化,从而间接对移植入体内的干细胞及其子代细胞的存活、迁移和分化进行无创性动态监测,以便对细胞治疗在临床上进行应用效果和安全性方面的评价。 1H-MRS是一种利用氢质子化学位移现象对特定原子核及化合物进行定量分析的功能性成像技术,在临床症状出现之前即可早期无创伤性地测量活体脑组织内的化合物的代谢变化。1H-MRS对NAA、Cho、Cr这三种化合物浓度的测量具有很好的可重复性和稳定性,可通过这些化合物浓度的变化反映脑内一些疾病的病理变化。NAA是正常波谱中的最高峰,位于2.02ppm处,主要在中枢神经系统的神经元中出现,而不出现在神经胶质细胞或者是非神经细胞组织中,是神经元及其附属物的特异性标记物,被称为神经元的内标记物。NAA的含量可反映脑内神经元的数量、功能和神经元的完整性,在神经元丧失或者是受损时,其浓度下降。在1H-MRS中,NAA含量或与其它代谢物的比值的减低,可作为神经元数量缺少和功能障碍的最佳指标。Cho的波峰位于3.2ppm处,反映脑内总胆碱的储藏量,包括游离胆碱、磷酸胆碱、磷脂酰胆碱和磷酸甘油胆碱等。它与细胞膜磷脂的分解和合成有关,可反映细胞膜的稳定性和神经胶质的增生。Cr代表肌酸一磷酸肌酸,为高能磷酸盐的储备形式,是能量代谢的标志,在脑内含量比较稳定,一般作为内参。 上述两项技术在本研究中的具体应用: ①面神经损伤后脑内移植NSCs后的MRI示踪研究:将24只SD大鼠随机分为4组,A、B和C组均行面神经切断,D组为正常大鼠。造模后1周,A、D组移植SPIO标记的GFP转基因胎鼠NSCs,B组移植未标记的GFP转基因胎鼠NSCs;C组移植含SPIO的NSCs培养液。分别于移植后第3天及第2、3、4周行MRI观察移植细胞在脑内的存活、迁移和分化,并于第4周处死大鼠,取材后观察GFP和SPIO双标的NSCs的迁移,并将该结果与MRI相比较。 ②面神经元凋亡的1H-MRS检测:对20只正常SD大鼠(对照组)及20只面神经高位损伤SD大鼠(实验组)行1H-MRS检测。测量面神经核区NAA、Cr和Cho的峰下面积,采用两独立样本均数t检验比较两组间NAA、Cho、NAA/Cr及Cho/Cr有无统计学差异。

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