多医院协作，统一方法，统一标准，调查昆明地区微生物感染的构成比，确定昆明地区的耐药现状；采用PCR扩增的方法，探讨昆明地区阴沟肠杆菌的耐药性与产AmpC酶基因的关系；研究昆明地区近年来MRSA及MRCNS的发生及发展，分析mecA与femA基因与MRSA及MRCNS多重耐药性的相关性。4年共分离常见细菌21459株，各年的革兰阴、阳菌的比例各不同，4年金黄色葡萄球菌中MRSA 逐年升高。革兰阴性菌分离率最高的是大肠埃希氏菌，分离率为第二位的是铜绿假单胞菌。在大肠埃希氏菌ESBLs+为35.8%～39.7%；克雷伯氏菌中ESBLs+为33.7%～38.5%。MSSA与MRSA，MSCNS与 MRCNS，产ESBLs与非产ESBLs耐药率有显著性差异。真菌感染及其耐药率逐年上升。PCR扩增AmpC酶的方法：ampC基因在阴沟肠杆菌中分布广泛，ampD基因突变可能与高产AmpC酶有关。PCR扩增mecA阳性率：MRSA mecA基因阳性率为97.8%；femA基因全部为阳性。MRCNS中mecA阳性率为97.3%；femA基因全部为阴性。MRSA与MRCNS无显著性差异；femA基因在MRCNS中未检出。选用适当引物进行mecA与femA基因PCR扩增既能鉴定菌株，又可判断其耐药类型，对指导临床治疗和从基因水平研究病原菌的耐药机制具有重要意义。建立昆明地区耐药检测网，每年向临床公布昆明地区耐药状况，指导临床合理用药。帮助临床医生从实验性用药改成为指导性用药，降低用药成本，减少住院日，提高医院诊断/治疗水平，创造极好的医疗及社会效益！已在多家医院应用。