摘要：
目的 评价新型分子靶向探针131I-PAMAM(G5.0)-SR、131I-PAMAM(G5.0)-GP及131I-PAMAM(G5.0)-SR/GP[其中,PAMAM(G5.0):第五代聚酰胺-胺;SR:丝氨酸-精氨酸-谷氨酸-丝氨酸-脯氨酸-组氨酸-脯氨酸(SRESPHP,简称SR);GP:甘氨酸-脯氨酸-亮氨酸-脯氨酸-亮氨酸-精氨酸(GPLPLR,简称GP)]在荷瘤甲状腺髓样癌(MTC)模型中的靶向性.方法 采用高效液相色谱法纯化和分析靶向肽SR、GP及SR/GP,分别将其与修饰后的PAMAM(G5.0)共价连接,合成前体药物PAMAM(G5.0)-SR、PAMAM(G5.0)-GP及PAMAM(G5.0)-SR/GP.采用动态光散射粒度分析法检测PAMAM(G5.0)键合靶向肽前后的纳米粒径及Zeta电位.采用氯胺T法对修饰后的PAMAM(G5.0)、PAMAM(G5.0)-SR、PAMAM(G5.0)-GP、PAMAM(G5.0)-SR/GP进行131I标记,合成阳性对照组[131I-PAMAM(G5.0)]及实验组[131I-PAMAM(G5.0)-SR、131I-PAMAM(G5.0)-GP、131I-PAMAM (G5.0)-SR/GP]的4种探针.通过薄层色谱法分别测定探针的标记率、放射化学纯度及稳定性.经模型鼠腹腔注射阴性对照组(Na131I)、阳性对照组及实验组探针后,分别于4、8、12、24及48 h进行SPECT/CT显像,并计算靶/非靶值(T/NT),同时处死裸鼠取肿瘤及重要脏器测定放射性,以每克组织百分注射剂量率(％ID/g)表示.组间同一时间点T/NT、组内不同时间点T/NT及组间24 h肿瘤放射性摄取值的比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 纯化后的靶向肽SR、GP和SR/GP的纯度均达99％.PAMAM(G5.0)键合SR、GP、SR/GP前后的纳米粒径分别为4.47、5.70、4.71、5.95 nm,Zeta电位分别为+37.95、+20.02、+28.34、+24.37 mV.131I标记4种探针的标记率均＞75％,放射化学纯度均＞90％,48 h的体外稳定性显示,放射化学纯度均在85％以上.SPECT/CT图像显示,实验组探针在不同时间的T/NT均较对照组有增高趋势:131I-PAMAM(G5.0)-GP在4h的T/NT(6.03±1.45)与阳性对照组(2.18±0.39)、阴性对照组(1.36±0.00)比较,且差异均有统计学意义(t=3.235,P=0.033;t=3.843,P=0.019);而131I-PAMAM(G5.0)-SR在8、12、24h的T/NT(5.12±1.65、4.82±0.09、3.41±1.01)均较阴性对照组(1.50±0.00、1.43±0.65、1.34±0.81)高,且差异均有统计学意义(t=4.004,P=0.017;t=3.388,P=0.027;t=4.180,P=0.009).实验组组内比较,131I-PAMAM (G5.0)-SR在24 h的T/NT(3.41±1.01)较131I-PAMAM(G5.0)-GP(2.10±0.67)高,差异有统计学意义(t=3.990,P=0.016).注射131I-PAMAM(G5.0)-SR的肿瘤放射性摄取在24 h[(1.80±0.18)％ID/g]均较实验组其他探针、阴性对照组及阳性对照组高,但差异无统计学意义(F=3.366,P=0.059).T/NT及肿瘤放射性摄取的达峰时间:131I-PAMAM(G5.0)-GP和131I-PAMAM(G5.0)-SR/GP为4h,1311-PAMAM(G5.0)和131I-PAMAM(G5.0)-SR为8h.131I-PAMAM(G5.0)-GP的放射性洗脱较快,12h的T/NT较4h下降约57％.结论 SR及GP提高了131I-PAMAMM(G5.0)对MTC的靶向性,131I-PAMAM(G5.0)-GP靶向MTC肿瘤新生血管使其在瘤体的摄取及代谢较快,有望应用于MTC SPECT显像,而131I-PAMAM(G5.0)-SR对MTC细胞具有很好的靶向性和滞留性,有望应用于MTC的靶向诊治及预后评估.
