目的：分析昆明医科大学第一附属医院新生儿重症监护室（N IC U ）肠杆菌科细菌耐药性变迁。方法收集该医院NICU 2010—2013年分离的648株肠杆菌科细菌，采用VITEK‐2及纸片扩散（K‐B）法进行药敏试验，试验结果以美国临床和实验室标准化协会（CLSI）2012年版为判断标准。结果该院 NICU 分离的肠杆菌科细菌中最常见的是大肠埃希菌（47．4％）、克雷伯菌属（38．1％）和肠杆菌属（10．3％）。标本主要来源于尿液（51．2％）、呼吸道（30．6％）和血液（15．1％）。肠杆菌科细菌对阿米卡星敏感率最高，为95．7％，对美罗培南、厄他培南和亚胺培南的敏感率平均分别为92．3％、90．9％和87．6％，对左氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素敏感率平均分别为87．1％、79．2％、69．0％，对头孢吡肟平均敏感率72．7％，对第三代头孢菌素平均敏感率低于56．0％。产超广谱β内酰胺酶（ESBL ）大肠埃希菌、克雷伯菌属检出率平均分别为46．3％、54．7％且呈逐年上升趋势。产ESBL菌株对大多数抗菌药物的敏感率低于非产ESBL菌株；但克雷伯菌属产ESBL菌株对碳青霉烯类抗生素敏感性显著高于非产ESBL株。共分离到对碳青霉烯类抗生素耐药菌株51株，主要为肺炎克雷伯菌。该类菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药率分别为83．7％、60．5％和95．3％。结论该院NICU肠杆菌科细菌ESBL的检出率较高，耐碳青霉烯类菌株不断出现，应引起高度关注。