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应用PCR-RFLP技术检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2基因-449 G/C多态性的实验研究

The experimental conditions for dimethyl arginine dimethylamine hydrolase 2 gene -449G/C polymorphism detaction with PCR-RFLP

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资源类型:
机构: [1]云南省第一人民医院650032 [2]昆明医科大学第一附属医院糖尿病科650032 [3]昆明医科大学第一附属医院超声科650032
出处:
ISSN:

关键词: 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 二甲基精氨酸二甲胺水解酶2 实验条件

摘要:
目的:确定聚合酶链反应-限制性片段长度多态性( Polymerase chain reaction-restricted fragment length polymor-phism,PCR-RFLP)技术检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(dimethyl arginine dimethylamine hydrolase 2,DDAH2)基因-449G/C的最适实验条件。方法对影响DDAH2基因PCR反应的主要因素进行研究。结果最适变性温度为95℃,最适退火温度为58℃,最适引物浓度为0.25μmol/L,最适2X Power Taq PCR Master Mix浓度为12.5μl,酶切体系为15.5μl体系中加5.0μl产物用5 U的限制性内切酶Sma I消化。结论应用PCR-RFLP技术建立的DDAH2基因-449 G/C位点多态位点检测方法简便、经济、快速。

基金:

基金编号: 昆医联合专项

语种:
第一作者:
第一作者机构: [1]云南省第一人民医院650032 [2]昆明医科大学第一附属医院糖尿病科650032
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):

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