资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型：
机构：
[1]昆明医学院第三附属医院头颈外科,云南昆明650118
[2]昆明医学院第一附属医院口腔颌面外科,云南昆明650032
外科科室
昆明医科大学附属第一医院
出处：
ISSN：
关键词：
瘢痕疙瘩
RNA干扰
质粒
Survivin
短发卡BNA
摘要：
目的 构建pSIREN-survivin/shRNA重组质粒并鉴定,为探索瘢痕疙瘩基因治疗的RNA干扰(RNAi)途径奠定基础.方法 根据基因库survivin cDNA序列及Reynolds设计原则,设计并合成两端有酶切位点的65个碱基的寡核苷酸链,退火成互补双链后用T4DNA酶克隆至线性化的RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express质粒中;转化大肠杆菌DH-5a菌株,提取质粒行酶切鉴定,测序分析.结果 PCR扩增片断出现465 bp大小的目的 基因条带与预期结果相符;双酶切见约65 bp目的 基因条带;插入片断测序结果与合成的寡核苷酸序列一致.结论 成功构建重组质粒pSIREN-survivin/shRNA,为下一步用脂质体转染瘢痕或肿瘤细胞的研究奠定基础.
第一作者：
第一作者机构：
[1]昆明医学院第三附属医院头颈外科,云南昆明650118
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
马静,赵留芳,刘流,等.pSIREN-survivin/shRNA表达载体的构建与鉴定[J].中国普通外科杂志.2011,20(05):507-511.
