摘要：
目的 观察应用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Survivin表达对细胞凋亡和细胞增殖的影响.方法 设计、合成特异性抑制Survivin表达的siRNA,转染瘢痕疙瘩成纤维细胞,通过半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测24h和48 h后成纤维细胞内Survivin mRNA和蛋白变化,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,噻唑蓝(MTT)测定成纤维细胞的增殖.结果 重组质粒成功转染瘢痕成纤维细胞,转染效率为67.0%;阳性质粒转染24h后,Survivin mRNA和蛋白表达明显降低,抑制率分别为52.2%和54.8%(P＜0.05),48 h后抑制率增至75.7%和76.7%.阳性质粒转染24 h凋亡率为11.9%,48 h增加至21.2%,显著高于阴性对照组和未处理组;细胞周期检测阳性质粒干扰组S期细胞减少,G2/M期所占比例增高,出现了G2/M期阻滞现象;MTT测定阳性质粒干扰组细胞生长曲线平缓.结论 特异性siRNA可以有效干扰瘢痕疙瘩成纤维细胞内Survivin mRNA和蛋白的表达,诱导细胞的凋亡和抑制细胞的增殖.
