摘要:
背景: 前期实验在大鼠脂肪干细胞培养中发现了梭形细胞中混杂一种特异细胞,呈巢状生长,形成铺路石样形态.这种细胞和脂肪干细胞关系密切,有必要明确其性质.目的: 分析这种特异细胞的表型及诱导成骨特性以判断这种细胞的性质.方法: 采用I型胶原酶分离大鼠脂肪干细胞,置于含有胎牛血清的培养基中培养,免疫荧光法检测培养梭形细胞、多角细胞的CD34、CD133、CD90,Flk-1表面标志;取第2代细胞,以成骨诱导液诱导分化,于培养14 d进行碱性磷酸酶和钙染色检验特异细胞的成骨分化特性.结果与结论: ①胎牛血清培养的脂肪干细胞可见大量多角细胞呈巢状生长,形成铺路石样形态,间或有梭形细胞存在.②梭形细胞CD90为阳性,CD34、Flk-1、CD133为阴性;多角形细胞CD34、Flk-1均为阳性,CD133部分为阳性,CD90为阴性.③碱性磷酸酶染色多角状细胞多数死亡,形成空白区,梭形细胞呈碱性磷酸酶阳性.④茜素红染色多角状细胞死亡,形成空白区,梭形细胞集聚形成红色钙结节影.结果证实脂肪干细胞培养中的特异细胞为血管内皮细胞.