摘要：
目的 探讨PCR扩增肺癌组织中puma基因第四外显子(GC含量76.44%)的最适实验条件.方法 通过改变PCR反应体系各组分的浓度和反应条件,探讨PCR反应体系最适浓度和反应条件.结果 PCR反应体系为dNTP 200μmol/L,普通Mgcl2 1.0 mmol/L,引物500 nmol/L,Taq DNA聚合酶0.1 U/μL,模板量不低于4 000 ng,普通10 ×扩增体系缓冲液5μL,总体积50μL.反应条件为94℃预变性5 min,94℃ 45 s、61℃45 s、72℃45 s循环33次,最后72℃延伸5 min.结论 确立了puma基因第四外显子的PCR扩增条件,为后续的突变研究奠定了基础.
