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绿色荧光蛋白转基因干细胞在癫痫大鼠脑内的存活及对脑电的影响

Survival of green fluorescent protein transgenic stem cells and its effect on electroencephalogram in hippocampus of epileptic rats

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资源类型:

收录情况: ◇ CSCD-E

机构: [1]昆明医学院第一附属医院神经内科云南省昆明市650032 [2]昆明医学院神经科学研究所云南省昆明市650031
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ISSN:

关键词: 干细胞 癫痫 移植 脑电图

摘要:
目的:观察神经干细胞和骨髓基质干细胞移植至癫痫大鼠海马后的存活、迁移与周围组织的整合、修复和对癫痫大鼠脑电的影响.方法:实验于2005-03/2006-02在昆明医学院神经科学研究所完成.①实验材料:6~8周龄绿色荧光蛋白转基因小鼠,雌雄不限,体质量40~60 g,由新加坡国立大学提供.健康雄性SD大鼠88只,体质量(300±20)g,由昆明医学院动物科提供.将88只SD大鼠随机分为对照组(n=8)、癫痫未移植组(n=8)、生理盐水组(n=24)、神经干细胞移植组(n=24)、骨髓基质干细胞移植组(n=24).②实验方法:剖取绿色荧光蛋白小鼠孕鼠脑,分离获得整个海马进行神经干细胞的分离,并采用免疫化学方法鉴定.取绿色荧光蛋白转基因小鼠股骨,进行骨髓基质干细胞的分离,并采用免疫组织化学方法鉴定.癫痫未移植组、生理盐水组、神经干细胞移植组、骨髓基质干细胞移植组大鼠注射300×105 U/kg,浓度80万U/mL青霉素制作癫痫大鼠模型,连续注射7 d,每次癫痫发作按Racine评分标准评分,对照组大鼠腹腔注射相同剂量的生理盐水作为对照.将分离、培养绿色荧光蛋白转基因小鼠神经干细胞和骨髓基质干细胞,移植至青霉素致癫痫大鼠的右侧海马内.③实验评估:移植后1,2,4周观察移植干细胞在大鼠脑内存活和迁移情况,并检测大鼠脑电改变.结果:88只大鼠全部进入结果分析,中途无脱落.①大鼠行为学改变:癫痫未移植组、生理盐水组、神经干细胞移植组、骨髓基质干细胞移植组大鼠均达到Racine分级Ⅳ~Ⅴ级,癫痫模型制备成功.②各组大鼠的脑电改变:移植干细胞可减少癫痫大鼠脑电的痫性发放,降低癫痫波的波幅,具有明显的抗痫效应.③干细胞移植后在海马内的存活和迁移:移植神经干细胞可在青霉素致痫鼠脑内存活和迁移,但随时间的延长,存活细胞数目减少.结论:干细胞移植于青霉素诱发的癫痫大鼠脑内能够存活、迁移,能够改善癫痫鼠的脑电生理功能,提示干细胞移植可能成为一种有效的癫痫治疗手段.

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第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医学院第一附属医院神经内科云南省昆明市650032
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