目的研究昆明地区2002～2004年轮状病毒肠炎患儿的病毒分子流行特征.方法收集昆明医学院第一附属医院2002、2003、2004年9～12月儿科住院和门诊轮状病毒肠炎患儿的粪便标本计210份.采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测轮状病毒基因组,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以及巢式-PCR(net-PCR)对5种主要的VP7的血清型(G1、G2、G3、G4和G9)进行分型,并采用RT-PCR对VP7阳性标本进行NSP4(非结构蛋白4)的基因扩增,选取30份标本用net-PCR法扩增出NSP4 CDNA 500bp送去测序.结果210份标本中轮状病毒基因阳性143份(68.1%),其中长型143份,未发现短型和混合型.143份阳性标本行RT-PCR扩增VP7全基因,134份获得阳性产物,进一步用net-PCR分型显示G3型73例(73/134,54.5%),G1型38例(28.4%),未分型11例(8.2%),混合型8例(6%),G4型4例(3%),未发现G2和G9型.所有VP7阳性标本均可以扩增出NSP4的全长,其中30份标本送去测序显示有变异.结论A组轮状病毒是目前昆明地区婴幼儿腹泻的主要致病原,在不同的3年中,轮状病毒电泳型以长型为主,血清型以G3、G1型为主,G4型少见,未见G2、G9型.3年监测结果显示NSP4存在变异,但未发现轮状病毒肠炎临床症状与NSP4的变异有关.