摘要:
目的探讨槐耳清膏在体外对人直肠癌HR8348细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用及其作用机理.方法将处于对数生长期的HR8348细胞用含槐耳清膏的培养基培养36 h,用四氮唑蓝(MTT)比色法检测吸光度(OD)值,计算抑制率;用甲基绿-派若宁染色法及TUNEL法检测细胞凋亡指数;用免疫组织化学方法检测bcl-2、bcl-xl、bax、bak及p53基因表达的情况.结果槐耳清膏对HR8348细胞的抑制率随浓度增加而上升,浓度为4.0 mg/ml时抑制率最大(71.1%),与5-FU组(浓度为10μg/ml)相比差异无显著性意义(P>0.05).甲基绿-派若宁染色法和TUNEL法均可见到典型的细胞凋亡、凋亡小体或出泡现象,凋亡指数随槐耳清膏浓度的增加而增加,当浓度达4.0 mg/ml时,凋亡指数迅速上升,甲基绿-派若宁法为0.162 0±0.012 8,TUNEL法为0.261 2±0.015 8,均大于5-FU组的凋亡指数(0.078 0±0.009 5和0.102 8±0.013 1),P<0.05.槐耳清膏组bcl-2、bcl-xl、bak、p53蛋白表达较空白对照组明显增强(P<0.05),而bax变化不明显(P>0.05).槐耳清膏组bak/bcl-2和bak/bcl-xl比值显著大于空白对照组.结论槐耳清膏在体外对人直肠癌HR8348细胞具有显著的抑制作用和凋亡诱导作用.槐耳清膏诱导人直肠癌HR8348细胞凋亡可能与提高bak/bcl-2、bak/bcl-xl比值及上调p53基因表达有关.