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miR-27a-3p在氧糖缺失-复氧复糖损伤PC12细胞中的表达及其对PC12细胞增殖、凋亡的影响

Expression of miR-27a-3p in PC12 cells damaged by oxygen-glucose deprivation and reoxygenation and its effects on proliferation and apoptosis of PC12 cells

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收录情况: ◇ 统计源期刊

机构: [1]昆明医科大学第一附属医院麻醉科,昆明650000
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关键词: 脑缺血 再灌注损伤 微小RNA-27a-3p 氧糖缺失-复氧复糖 细胞增殖 细胞凋亡

摘要:
目的探讨miR-27a-3p在氧糖缺失-复氧复糖(OGD/R)损伤PC12细胞中的表达及其对OGD/R损伤PC12细胞增殖、凋亡的影响。方法将PC12细胞随机分为正常培养(Normal组)、氧糖缺失2 h后分别复氧复糖3 h、6 h和9 h组,q RT-PCR法检测各时点miR-27a-3p表达。之后将PC12细胞随机分为正常对照(Ctrl组)、氧糖缺失2 h复氧复糖(OGD/R组),慢病毒分别转染miR-27a-3p模拟物、模拟物阴性对照、抑制剂和抑制剂阴性对照入细胞后行OGD/R,分别设为Mimics组、Mimics-Ctrl组、Inhibitor组和Inhibitor-Ctrl组,CCK-8法检测各组细胞复氧复糖后24、48、72和96 h细胞的增殖活性;根据前述结果,选择miR-27a-3p表达差异最大的时间点进行复氧复糖,RT-q P-CR法检测各组miR-27a-3p、凋亡相关因子Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA表达,Western blotting法检测各组CleavedCaspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达。结果与Normal组相比,3 h、6 h、9 h组miR-27a-3p表达在OGD/R后均降低(P均(0.05),6 h组呈最低(P(0.05)。与Ctrl组比较,复氧复糖后48、72和96 h,OGD/R组细胞增殖活性均降低(P均(0.05);与Mimics-Ctrl组比较,24、48、72和96 h时Mimics组细胞的增殖活性均升高(P均(0.05);与Inhibitor-Ctrl组比较,72 h和96 h时Inhibitor组细胞增殖活性均降低(P均(0.05)。复氧复糖后6 h,与Ctrl组比较,OGD/R组miR-27a-3p表达降低(P(0.05),Caspase-3、Bax mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均(0.05),Bcl-2表达量降低(P(0.05);过表达miR-27a-3p后,miR-27a-3p表达升高(P(0.05),Caspase-3、Bax mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均(0.05),Bcl-2表达量升高(P(0.05),抑制miR-27a-3p表达后结果与之相反。结论 miR-27a-3p在OGD/R损伤PC12细胞中呈低表达,miR-27a-3p能促进OGD/R损伤PC12细胞的增殖并抑制其凋亡。

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第一作者机构: [1]昆明医科大学第一附属医院麻醉科,昆明650000
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