摘要:
目的探讨沉默Rho家族GTP酶3(RND3)表达对氧糖缺失/复氧复糖(OGD/R)损伤海马神经细胞炎症反应和细胞凋亡的影响。方法使用包有沉默RND3表达的短发夹RNA(shRND3)及其阴性对照(shRND3-NC)序列的慢病毒载体分别对海马神经细胞进行转染。转染成功后对细胞进行2 h的缺氧缺糖培养再行复氧复糖建立OGD/R模型。CCK-8法检测细胞活力,RT-qPCR检测RND3及炎症和凋亡相关分子的mRNA表达,Elisa检测细胞上清液中炎症因子的浓度,Western Blot检测RND3和凋亡蛋白以及胞核内NF-κB的蛋白表达,Annexin V-FITC/PI染色和流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果与正常细胞相比,OGD/R损伤后细胞活力降低(P (0.001),炎症因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)和NF-κB表达升高(P (0.001),促凋亡蛋白(Caspase-3和Bax)表达升高(P (0.001),抗凋亡蛋白(Bcl-2)表达降低(P (0.001),细胞的凋亡率升高(P (0.001)。与沉默RND3阴性组相比,沉默RND3后,细胞活力增加(P (0.01),炎症因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)和NF-κB表达降低(P (0.001),促凋亡蛋白(Caspase-3和Bax)表达降低(P (0.001),抗凋亡蛋白(Bcl-2)表达升高(P (0.001),细胞的凋亡率下降(P (0.001)。结论沉默RND3表达通过抑制炎症反应和细胞凋亡减轻海马神经细胞的OGD/R损伤,沉默RND3抑制炎症反应的机制可能与抑制NF-κB通路有关。