资源类型：
文章类型：
机构：
[1]昆明医科大学第一附属医院整形外科,昆明 650032
外科科室
整形外科
昆明医科大学附属第一医院
[2]云南大学生命科学院,昆明 650500
[3]昆明医科大学公共卫生学院,昆明 650500
出处：
关键词：
生物医学工程学
外周血
内皮祖细胞
细胞纯化
免疫组织化学双标染色
摘要：
目的:从自体外周血提取纯化具有优异新生血管及管腔形成能力的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),为组织工程血管化的研究提供优质、取材方便、血管化能力强的种子细胞.方法:抽取新西兰大耳白兔外周血,采用密度梯度离心法、贴壁法提取纯化外周血EPCs,在内皮细胞培养基(endothelial cell medium,ECM)内进行培养.取第三代细胞,利用免疫荧光染色的方法检测贴壁细胞CD34、CD133、vWF的表面标志,以及免疫组织化学双标染色鉴定EPCs.结果:抽取的外周血用密度梯度离心法结合贴壁培养法提取纯化并进行扩增,获得高纯度的EPCs,第三代外周血EPCs抗原CD34、CD133、vWF免疫荧光鉴定均为阳性;EPCs的免疫组织化学双标染色(同时摄取乙酰化低密度脂蛋白及荆豆凝集素的免疫荧光复合染色)鉴定也证实,分离培养的细胞为血管EPCs.结论:兔外周血经密度梯度离心分离及贴壁法纯化,可获得纯度较高的EPCs.
基金：
高等学校博士学科点专项科研基金（20135317110002）；国家自然科学基金（81460296）；云南省科技厅-昆明医科大学应用
基础研究联合专项资金（2014FB026）；云南省医疗卫生单位内设研究机构科研项目（2014NS154）
第一作者：
第一作者机构：
[1]昆明医科大学第一附属医院整形外科,昆明 650032
推荐引用方式(GB/T 7714)：
赵娴,魏韩笑,周箐竹,等.外周血内皮祖细胞纯化与鉴定[J].中国科技论文在线精品论文.2017,10(17):1934-1941.
